分析Y迷宫的实验步骤
点击次数:2674 更新时间:2020-11-24
Y迷宫(Y-Maze)是方位记忆考察中常见的实验范式。主要应用于动物的辨别性学习、工作记忆及参考记忆的测试。Y迷宫由三个*相同的臂和连接区组成。每个臂尽头有食物提供装置,根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。通过灯光和电刺激,使动物形成回避条件反射,观察和记录动物的回避条件反应能力和空间辨别能力。分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。
1.筛(预)选
(1)将大鼠放入Y-迷宫箱中适应3~5min后,给予适当电击至其对3臂均探索进入为止。选择活跃,对电击反应较敏感,逃避反应迅速者供测试用。淘汰反应过于迟钝或特别敏感的大鼠。
(2)预选出达到电击次数≤3次时连续2次正确反应的动物,即对电击反应较敏感的大鼠供实验用。
(3)在上述初步筛选的基础上,通过正式迷宫训练,淘汰达不到学会标准(学不会)的大鼠。
2.正误判定的标准
大鼠受电击后从起步区直接逃到安全区或通电后10s内一次性跑向安全区为“正确反应”,若逃到无灯光的任何另一臂,则记为错误反应。
3.达标(学会)标准
(1)连续10次中有9次或以上正确反应(正确反应率≥90%)定为学会标准。
(2)每个实验日进行20次训练测试,错误反应次数(errorsnumberEN)≤2次。全天总反应时间(totalreactiontimeTRT)≤120s作为判定大鼠学会的标准。因为EN反映大鼠反应的正确程度,TRT反映大鼠反应时间的长短,可综合评价大鼠的学习记忆能力,因而此标准更为合理。
以上为每只大鼠达标(学会)标准,全组大鼠达标(学会)标准为全组正确率(学会动物数/该组动物总数×100%)达85%以上。
4.学习测试
实验时先将大鼠放入迷宫中适应3~5min,然后再开始正式实验。
(1)随机休息法:安全区以无规则次序变换,以训练大鼠辨别灯光刺激及安全的能力,大鼠受电击后逃到安全区后,灯光继续作用10~15s,熄灯后结束一次测试,大鼠所在支臂就作为下一次测试的起点,两次测试时间间隔为30s或休息1min后再予以第2次测试,依次重复,测试至达连续9/10标准。
(2)随机不休息法:安全区以无规则的次序变换开始时,对大白鼠所在支臂与另一支臂通电,动物在电击下逃窜至灯光区后再保持l0s或30s为一次测试。然后动物所在支臂为下次测试的起始位置进行下一次测试。
(3)顺序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂轮流作为起步区或安全区。
以上方法还可以分为两类:①每天固定训练次数,一般是20次,连续训练3~4d。大鼠一般都能达到学会标准。②不固定训练次数,采用分段连续训练法,即每训练10次,休息1min,连续训练直到学会为止,训练在1d内完成。
5.记忆保持(再现)测试
学习测试24h、48h、1周、30d后,再以同样方法测试至9/10标准,正确反应次数定为A,以A/10表示记忆的保持能力,此值越高说明记忆力越好。